Procédés de purification poussés (HPLC ou même PAGE)
Un contrôle qualité rigoureux (surveillance online du trityl et MALDI-TOF MS)
Des Délais de Production Très Rapides
Délais de 3 à 5 jours ouvrables
Système Simple de Commande en Ligne
Site en ligne facile à utiliser, doté d'une série d'outils utiles (par exemple, suivi et historique des commandes, option de recherche et de commande pratique)
Un portefeuille de services complet
Possibilité d'ajuster l'affinité de liaison via MGB, LNA et autres amplificateurs Tm, ou même de combiner différents amplificateurs Tm pour personnaliser votre dosage.
Grand choix de combinaisons fluorophores - quenchers
Service de conception professionnelle
Processus de production certifié EN ISO 13485:2016
Le développement, la validation, la production et les tests des dosages qPCR et PCR numériques peuvent être externalisés chez Microsynth.
Les sondes dites TaqMan sont des sondes d'hydrolyse qui sont conçues pour augmenter la spécificité de la PCR quantitative.
À l'état hybridé, la proximité du fluorophore et du quencher est suffisante pour éteindre la fluorescence. Pendant la PCR, l'activité exonucléase 5'-3' de la Taq polymérase est utilisée pour cliver la sonde à double marquage. Le fluorophore et le quencher sont ainsi séparés et un signal de fluorescence permet une mesure quantitative.
La sonde TaqMan augmente considérablement la spécificité de la détection. Nous serions heureux de vous aider à concevoir les sondes et les amorces associées.
Les sondes qPCR habituelles pour les analyses avec nucléase 5' ont un fluorophore à l'extrémité 5' et un quencher approprié à l'extrémité 3' qui, d'une part, élimine la fluorescence du dyes et, d'autre part, empêche la prolongation de la sonde pendant la réaction qPCR. Pour des sondes plus longues et donc une plus grande distance entre le fluorophore et le quencher, le bruit de fond augmente souvent et devient trop important.
Les sondes avec double quencher réduisent le bruit de fond et augmentent la sensibilité. En incorporant un quencher supplémentaire dans la séquence près du fluorophore 5', on peut obtenir une amélioration significative des résultats. Le nouveau quencher IQ-500, avec un maximum d'absorption d'environ 500 nm et une plage d'extinction d'environ 450 nm à 550 nm, est conçu comme une modification interne de 3'.
Les sondes double quencher contiennent un fluorophore 5'-FAM, un quencher 3'-BHQ-1 et un quencher interne IQ-500 à une distance de 8 à 10 bases du fluorophore.
Nous serions heureux de vous aider à designer les sondes et les amorces associées.
Le Locked Nucleic Acid (LNA) s'est révélé être un outil puissant dans de nombreuses applications de qPCR et de PCR digitale. Lorsqu'il est incorporé dans des oligonucléotides d'ADN il offre les avantages suivants par rapport aux bases d'ADN à l'état natif uniquement :
Stabilité thermique et spécificité d'hybridation accrues Une quantification plus précise des gènes et une discrimination allélique Des designs plus simples et plus modulables pour les séquences cibles problématiques
Chaque ajout de base LNA dans un oligo augmente la Tm d'environ 2-4 °C et les sondes d'acide nucléique avec LNA peuvent être conçues pour avoir un ΔTm de >15°C. Habituellement, pas plus de 5 bases LNA sont incorporées dans la séquence d'une sonde. Lors de la conception et de l'optimisation de vos sondes LNA, veuillez suivre les recommandations décrites ici.
Chez Microsynth, vous pouvez commander votre sonde LNA avec la gamme complète de dyes et de quenchers que nous proposons également pour nos sondes à double marquage.
