Biologie purification

Biologie purification

Biologie purification

En biologie, la purification s'effectue sur les protéines et est réalisée en plusieurs étapes. La cellule ou le tissu dont on veut purifier les protéines est tout d'abord broyé afin de rompre les différentes parois et membranes. Pour cette étape, on peut également utiliser un détergent spécifique ou bien la centrifugation.

Les protéines sont ensuite séparées, généralement par précipitation différentielle ou parfois en utilisant un solvant polaire. Enfin, les protéines sont purifiées à l'aide de différentes techniques de chromatographie. La chromatographie échangeuse d'ions est particulièrement adaptée aux purifications très fines. Sinon, on peut également utiliser la purification par affinité qui utilise un ligand sur lequel se fixent les molécules.
La purification des protéines peut ensuite être évaluée grâce à l'électrophorèse qui permet de vérifier la présence d'une seule protéine dans un échantillon. La technique de purification employée ne doit pas provoquer de perte substantielle de quantité de protéine.

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