Nous cherchons à créer une gélose avec comme source principale de carbone la kératine. Comment pouvons nous faire pour ajouter notre kératine provenant de laine de mouton à notre gélose?

Pour intégrer la kératine, extraite de la laine de mouton, comme source de carbone dans votre gélose, il est crucial de procéder à une hydrolyse contrôlée afin de solubiliser la kératine. La kératine est une protéine fibreuse insoluble, donc une hydrolyse enzymatique ou chimique est nécessaire. Pour l'hydrolyse enzymatique, utilisez des protéases spécifiques, comme la kératinase, qui dégradent la structure rigide de la kératine en peptides solubles et acides aminés. Cette solution hydrolysée peut ensuite être stérilisée par filtration (0,22 µm) pour éviter la dénaturation thermique avant son incorporation dans le milieu gélosé.

Pour l'hydrolyse chimique, utilisez des agents réducteurs comme le dithionite de sodium sous des conditions contrôlées de pH et de température pour rompre les ponts disulfure. Une fois l'hydrolyse achevée, neutralisez le pH et filtrez la solution avant de l'ajouter au milieu nutritif. La concentration optimale de kératine hydrolysée dans le milieu doit être déterminée empiriquement pour garantir la croissance microbienne souhaitée.