Question
En cours de résolution
Je cherche les fluorophores que je peux utiliser simultanément en Taqman sur un appareil LC480. Des recommandations ?
1 Réponse
Le 24/06/2024
Pour une utilisation simultanée de fluorophores en TaqMan sur un appareil LightCycler 480 (LC480), il est crucial de choisir des fluorophores dont les spectres d'excitation et d'émission sont suffisamment distincts pour éviter le chevauchement et l'interférence. Le LC480 est équipé de plusieurs canaux de détection, chacun avec des filtres spécifiques. Voici quelques recommandations de fluorophores qui peuvent être utilisés simultanément sur ce type d'appareil :
1. **FAM (Fluorescein amidite) :**
- **Excitation** : 495 nm
- **Émission** : 520 nm
- **Canal** : 465-510 nm
2. **HEX (Hexachlorofluorescein) ou VIC :**
- **Excitation** : 535 nm
- **Émission** : 556 nm
- **Canal** : 533-580 nm
3. **ROX (Carboxy-X-Rhodamine) :**
- **Excitation** : 575 nm
- **Émission** : 602 nm
- **Canal** : 533-610 nm
4. **Cy5 (Cyanine 5) :**
- **Excitation** : 650 nm
- **Émission** : 667 nm
- **Canal** : 618-660 nm
5. **Texas Red :**
- **Excitation** : 596 nm
- **Émission** : 620 nm
- **Canal** : 533-610 nm
6. **Quasar 670 :**
- **Excitation** : 647 nm
- **Émission** : 670 nm
- **Canal** : 640-700 nm
Il est essentiel de vérifier les spécifications exactes des filtres de votre LC480, car la disponibilité des canaux peut varier légèrement en fonction de la configuration de l'appareil.
### Conseils pratiques :
- **Vérifiez les spectres :** Avant de sélectionner vos fluorophores, consultez les spectres d'excitation et d'émission pour vous assurer qu'il y a un chevauchement minimal entre les fluorophores choisis.
- **Calibration de l'appareil :** Effectuez une calibration de l'appareil avec les fluorophores choisis pour garantir des mesures précises.
- **Contrôles :** Utilisez des contrôles pour chaque fluorophore afin de vérifier qu'il n'y a pas de contamination croisée entre les canaux.
### Produits recommandés :
- **TaqMan Probes (Thermo Fisher Scientific) :** Un large choix de sondes TaqMan pré-conjuguées avec différents fluorophores compatibles avec LC480.
- **LightCycler Probes (Roche) :** Spécifiquement conçues pour une compatibilité optimale avec les instruments LightCycler.
En résumé, pour une utilisation optimale des fluorophores en TaqMan sur un LC480, sélectionnez des fluorophores dont les spectres sont distincts et compatibilisez-les avec les canaux de détection de votre appareil. Assurez-vous toujours de vérifier les spécifications techniques de votre instrument pour une meilleure adéquation.
1. **FAM (Fluorescein amidite) :**
- **Excitation** : 495 nm
- **Émission** : 520 nm
- **Canal** : 465-510 nm
2. **HEX (Hexachlorofluorescein) ou VIC :**
- **Excitation** : 535 nm
- **Émission** : 556 nm
- **Canal** : 533-580 nm
3. **ROX (Carboxy-X-Rhodamine) :**
- **Excitation** : 575 nm
- **Émission** : 602 nm
- **Canal** : 533-610 nm
4. **Cy5 (Cyanine 5) :**
- **Excitation** : 650 nm
- **Émission** : 667 nm
- **Canal** : 618-660 nm
5. **Texas Red :**
- **Excitation** : 596 nm
- **Émission** : 620 nm
- **Canal** : 533-610 nm
6. **Quasar 670 :**
- **Excitation** : 647 nm
- **Émission** : 670 nm
- **Canal** : 640-700 nm
Il est essentiel de vérifier les spécifications exactes des filtres de votre LC480, car la disponibilité des canaux peut varier légèrement en fonction de la configuration de l'appareil.
### Conseils pratiques :
- **Vérifiez les spectres :** Avant de sélectionner vos fluorophores, consultez les spectres d'excitation et d'émission pour vous assurer qu'il y a un chevauchement minimal entre les fluorophores choisis.
- **Calibration de l'appareil :** Effectuez une calibration de l'appareil avec les fluorophores choisis pour garantir des mesures précises.
- **Contrôles :** Utilisez des contrôles pour chaque fluorophore afin de vérifier qu'il n'y a pas de contamination croisée entre les canaux.
### Produits recommandés :
- **TaqMan Probes (Thermo Fisher Scientific) :** Un large choix de sondes TaqMan pré-conjuguées avec différents fluorophores compatibles avec LC480.
- **LightCycler Probes (Roche) :** Spécifiquement conçues pour une compatibilité optimale avec les instruments LightCycler.
En résumé, pour une utilisation optimale des fluorophores en TaqMan sur un LC480, sélectionnez des fluorophores dont les spectres sont distincts et compatibilisez-les avec les canaux de détection de votre appareil. Assurez-vous toujours de vérifier les spécifications techniques de votre instrument pour une meilleure adéquation.
Domaine(s) concerné(s) :
Informations :
Postée le : mardi 8 septembre 2020
je cherche les fluorophores que je peux utiliser simultanément en Taqman sur un appareil LC480
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